支原体概述
支原体（mycoplasma）：又称霉形体，为目前发现的最小的最简单的原核生物。支原体细胞中唯一可见的细胞器是核糖体（支原体是原核细胞，原核细胞的细胞器只有核糖体）。归属于柔膜体纲，支原体目（Mycoplasmatales），支原体科；其下分为支原体属、脲原体属。
能够从人体分离出的支原体共有16种，其中7种对人体有致病性。
常见与泌尿生殖道感染有关的支原体有解脲支原体（U.urealyticum，Uu）、人型支原体（M.hominis，Mh）、生殖支原体（M.genitalium，Mg）。
肺炎支原体（M.Pneumonia）是人类支原体肺炎的病原体。支原体肺炎的病理改变以间质性肺炎为主，有时并发支气管肺炎，称为原发性非典型性肺炎。
实验室检查方法
1、相差显微镜直接镜检法：肺炎支原体检查，取咽部分泌物，生理盐水涂片，直接镜检，优点：快速、便捷；缺点：检验需要高年资、经验丰富的检验师，不同的检验人员，准确性难以统一。
2、血清学检测（金标法或酶法）：肺炎支原体检查，抽取静脉血，检测血清中IgM抗体，优点：特异性强，敏感度高，缺点：由于发病初期，机体中尚未产生抗体不能被检出，发病时间较长此法才有意义。
（支原体低倍镜下油煎蛋养菌落）
3、快速培养法：液体培养基和固体培养基两种。
培养法的优点是操作简单、取材无创伤，被越来越多的临床实验室所推广，也被越来越多的患者所接受，缺点：液体培养基无法有效进行质量控制，针对因杂菌引起的假阳性无法完全避免。而固体培养出油煎蛋样菌落，时间较长，若液体+固体两种培养基同时培养，成本较高。
4、荧光定量PCR法：PCR检测质粒核酸快速、特异、敏感，但需昂贵设备，不易普及，且方法过于敏感，容易受污染，结果受标本状况影响较大。
5、支原体细胞分离培养：该方法可获得肺炎支原体，可以确诊。由于支原体分离培养要求苛刻，医院实验室难以推广。此法阳性率低，需时3周甚至更长时间，对临床快速诊断意义不大。
快速培养（液体培养基）
一、目前实验室常用的肺炎支原体快速培养试剂盒：
培养基主要成份：
牛心消化液、酵母粉、葡萄糖、杂菌抑制剂（青霉素和醋酸陀等）、化学显色指示剂。
检测原理：
利用肺炎支原体的代谢产物使培养基液体中的指示剂颜色发生改变来判断其生长，标本中的其他支原体和细菌则被培养基中的青霉素和醋酸陀抑制。
结果判断：
35℃～37℃孵育24～48h，观察结果。培养基由红色变为绿色、黄色，且仍保持清晰透明，说明有肺炎支原体生长，明显混浊变色者不能视为阳性。培养液颜色不变，应判为无肺炎支原体生长。
常见问题
明显的阴性和阳性不再赘述，只列举几种常见问题：
1、判断标准界限不清：
仅仅靠颜色变化、培养液是否清亮来判断是阴性和阳性，判断阴阳性界限不够明确。
据产品技术顾问介绍：大量沉淀可视为杂菌、分泌物干扰，有少量沉淀可以忽略，只要培养基清亮即可报阳性，小编想问，什么是大量？什么是少量？有没有中等量？沉淀的量如何量化？
2、如何界定杂菌污染？
若患者支原体感染，因杂菌干扰，导致颜色变化或浑浊，报告阴性的话，岂不是漏检？如果试剂中的抑菌药物遇到了耐药菌，无法抑制杂菌，结果如何判断？
比如该标本上清液清亮，足以看清对面标签字体。如果按照判断标准，应该判断为阳性。
仔细查看瓶子底部，一层白色沉淀。遂用吸管吸取底部沉淀，取一张玻片，涂湿片，镜检发现：
可见大量念珠菌孢子和菌丝
可以判断为杂菌生长吗？那问题来了，如何判断颜色变化是因为杂菌生长引起，还是支原体生长引起的颜色变化？如果需要PCR等其他手段复核确证，岂不是培养方法等于白做？
二、目前实验室常用的生殖道支原体培养试剂盒：
培养基主要成份：
肉汤、马血清、酵母提取液、酚红指示剂、混合抗生素、生长因子、尿素和精氨酸等物质。
检测原理：
Uu和Mh生长时，尿素和精氨酸分解生成的碱性物质引起PH值上升，培养基由黄色变成红色，混合抗生素可以抑制标本中的其他细菌和真菌的生长。
结果判断：
35℃～37℃孵育24h和48h分别观察结果。
培养基清晰透明的红色为阳性，黄色或橙黄色为阴性，浑浊红色可视为污染。
C-空白孔若阳性表示污染，试验无效；
C+对照孔48h阴性，可以报告阴性；
常见问题
一、污染界定问题：上述生殖道支原体培养基与肺炎支原体快速培养基面临同样的问题，如何界定是污染菌引起的颜色变化还是真正支原体引起的颜色变化？
如果加做固体培养基，基本可以排除假阳性问题，但不能单独收费，导致检测成本增加，是一个非常现实的问题。
目前大多数实验室使用的只有液体培养基，固体培养基尚未普及。
二、检测方法的局限性：
1、一次检验结果阴性，并不能确定没有感染，检测结果很大程度上依赖于标本采集；
2、阳性结果指示泌尿生殖道支原体存在，不能作为充分的临床诊断依据，临床诊断需要结合临床症状。
三、临床诊断价值有限：
泌尿生殖道支原体存在无症状携带，支原体在泌尿生殖道存在定植现象，人群中存在着相当数量的支原体携带者而没有症状和体征，以Uu最为突出。也就意味着，即使UU阳性，并不一定就是临床感染。
阴道分泌物经培养检出解脲支原体的几率较高，但常无明确的临床意义，在临床工作中需要谨慎的判断泌尿生殖道检出解脲支原体的临床意义。
必须具有明显的泌尿生殖道感染指征，且培养出生殖道支原体，排除其他病原菌（霉菌、滴虫等）引起的感染。
和泌尿生殖道支原体感染相关的疾病
1、尿道炎：支原体是泌尿系感染的常见致病微生物，由支原体导致的泌尿系感染以尿道炎最为多见，其他还包括肾盂肾炎等。
目前认为非淋菌造成的尿道炎中，35%～50%与衣原体感染相关，20%～40%与支原体相关，其余病因尚不清楚。Uu和Mg已被证明是男性非淋菌性尿道炎病原体。
2、宫颈炎和盆腔炎：近年来，已有大量证据证明生殖支原体Mg是宫颈炎、子宫内膜炎、盆腔炎、男性生殖道疾病和输卵管性不孕的病因。生殖支原体有很重要的临床意义，但我国的生殖支原体临床检测很少。
目前，大多数临床研究认为不需要对孕期下生殖道检出Uu的患者进行干预和治疗。因此，如果怀疑下生殖道支原体上行感染至宫腔导致绒毛膜羊膜炎及早产，需要从上生殖道取样进行评估。
3、泌尿生殖道支原体的检出对男性精液质量的影响
有很多临床研究显示解脲支原体可能影响精子活动度，其原因可能是支原体粘附影响精子活动，也有可能是支原体诱导抗精子抗体的产生。支原体与精子活动度之间有相关性，但未能明确其致病性。
4、泌尿生殖道支原体的检出对辅助生殖的影响
多项研究表明，男女双方生殖道Uu培养阳性对IVF的受精率、异常受精率、卵裂率、临床妊娠率及流产率均没有明显影响，认为宫颈解脲支原体阳性不影响体外授精及胚胎移植的妊娠结局。
感言
我国支原体检测技术相对落后，目前国内医疗机构进行解脲支原体（UU）和人型支原体（Mh）检测，主要使用液体培养基直接检测并同时进行支原体药敏试验。
但是，这种方法有时候会受到细菌或真菌的污染导致假阳性，因此需要固体培养基确认菌落形态才能最后诊断。而且这种方法不能区分Up和Uu。区分Uu和Up主要使用核酸检测的方法。
医院不能常规开展PCR检查，限制了泌尿生殖道支原体感染的临床诊断与研究。另外，对于支原体感染，一定要充分评估患者及配偶感染的危险因素，根据不同支原体的致病特点区别对待，这样才能提高对支原体感染的诊治水平。
支原体培养，想说爱你，并不容易！
参考文献
1、在《中国性科学》发表的《生殖道支原体感染诊治专家共识》
2、支原体分离培养药敏试剂盒产品说明书
3、肺炎支原体检测试剂盒说明书
陈众